尼罗罗非鱼精巢支持细胞分离培养体系建立及优化

本研究分离培养尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)精巢支持细胞(Sertoli cells, SCs)，建立并优化尼罗罗非鱼精巢支持细胞分离培养体系。无菌条件下，取发育至第Ⅲ期的尼罗罗非鱼精巢，PBS清洗后，剪碎精巢组织，0.25%胰蛋白酶消化，用含10%犊牛血清(Newborn bovine serum, NBS)的L-15培养液终止消化，过滤、离心，获得细胞。差速贴壁法获得SCs后，在26℃、无CO2饱和湿度恒温培养箱中培养。分别采用含10% NBS的L-15、M199、F12培养液，含5%、10%、15% NBS的L-15培养液，含1%罗非鱼血清的L-15+10% NBS培养液培养尼罗罗非鱼SCs。各组每2 d取细胞计数，绘制SCs生长曲线；甲基绿染色，倒置显微镜下观察SCs的形态。尼罗罗非鱼SCs培养1~2 d，细胞贴壁；培养3~5 d，细胞完全贴壁并迅速增殖。单个SCs呈不规则多边形，其核位于胞质中央，呈卵圆形，胞质中可见吞噬颗粒和空泡，空泡聚集于支持细胞胞质的两极或散布于核的四周。SCs在L-15培养液中贴壁生长，在F12、M199培养基中较难贴壁。与F12、M199培养液相比，L-15培养液更有助于尼罗罗非鱼SCs生长增殖(P<0.01)。与添加5%和15% NBS相比，在L-15培养基中添加10% NBS更有助于尼罗罗非鱼SCs生长增殖(P<0.05)。与未添加尼罗罗非鱼血清相比，在10% NBS+L-15培养中添加1%尼罗罗非鱼血清，能显著促进SCs生长增殖(P<0.05)。研究表明，采用胰酶消化差速贴壁法获得尼罗罗非鱼精巢支持细胞，10% NBS+1%罗非鱼血清+L-15培养液培养，能显著促进尼罗罗非鱼精巢支持细胞生长增殖。     

基于线粒体COI基因的马科鱼类DNA条形码研究

为明确中国马鲅科(Polynemidae)鱼类的分类地位,测定了中国7省10个地点马鲅科鱼类3属5种33条COI基因5′端序列,结合GenBank下载的5属16种41条同源序列,共分析了6属20种马鲅科鱼类DNA条形码。结果显示,20种鱼类种间平均遗传距离为19.6%,是种内平均遗传距离0.9%的22倍;其中14种形成了单系分支,支持其物种有效性。四指马鲅(Eleutheronema tetradactylum)和多鳞四指马鲅(E.rhadinum)种间遗传距离(16.0%)是种内平均遗传距离(1.2%)的13倍,支持将二者作为2个独立物种的分类处理。多鳞四指马鲅种内遗传距离(2.3%)大于2%,形成了2个自展数据支持率为99%的分支,分支间遗传距离(4.8%)是分支内平均遗传距离(0.1%)的48倍,表明在中国沿海分布的多鳞四指马鲅有可能存在2个亚种或隐藏种。黑斑多指马鲅(Polydactylus sextarius)与马达加斯加多指马鲅(P.malagasyensis)外部形态极为相似,种间遗传距离仅为1.0%,且在分子系统树上镶嵌混杂为一支,仅根据分子数据结果,推测二者可能为同一物种;但由于没有可检视的标本,也不能排除GenBank序列种名注释中形态鉴定出错的可能。马伦氏多指马鲅(P.mullani)与七丝指马鲅(Filimanus heptadactylus)也混为1支,分支内遗传距离仅为0.1%;如果不是GenBank序列种名注释出错,则二者应为同一物种。GenBank序列中来源于北部湾的六丝多指马鲅(P.sexfilis),则可能是黑斑多指马鲅的错误鉴定。     

4个企鹅珍珠贝F3选育系的生长存活差异及其生长规律

为比较企鹅珍珠贝[（Röding，1798）]海南金唇选育系（GLHH）、海南白唇选育系（WLHH）、广西金唇选育系（GLGG）和广西白唇选育系（WLGG）的生长存活差异，及了解4个选育系的生长规律，自2018年1月底至2018年12月底连续监测养殖于海南陵水黎族自治县新村港的4个企鹅珍珠贝选育系F₃的存活率及其壳长、壳高、壳宽、铰合线长和体重的生长情况。使用单因素方差分析和生长模型拟合等方法对数据进行分析。结果显示，4个企鹅珍珠贝选育系的生长及存活率存在显著差异（<0.05），海南金唇选育系的生长及存活率最优，广西白唇选育系的生长及存活率最差，表明企鹅珍珠贝的生长存活可能与环境、贝龄、壳色和地理种群有关。SGompertz生长模型为企鹅珍珠贝5个生长性状的通用生长模型。研究表明，4个企鹅珍珠贝选育系的生长规律存在差异，且企鹅珍珠贝5个生长性状的生长规律存在差异，其中壳长和铰合线长的生长拐点出现得最早，分别出现在7.9（GLHH）~8.5（WLHH）月龄和7.9（GLHH）~9.1（WLGG）月龄；其次是壳高和壳宽，生长拐点分别出现在11.6（GLHH）~15.9（WLGG）月龄和11.8（GLHH）~14.3（WLGG）月龄时；体重的生长拐点出现得最晚，在15.8（GLHH）~18.7（WLGG）月龄。该研究结果表明海南金唇选育系早期生长阶段具有高存活率和优良的生长性能，广西白唇选育系可能具有最大的生长潜力（生长性状的生长极限最大），本研究可为企鹅珍珠贝的良种选育、健康养殖及优质珍珠的生产提供借鉴。     

俄罗斯与哈萨克斯坦农业支持水平及支持政策比较研究

俄罗斯与哈萨克斯坦是欧亚经济联盟的重要成员国,是丝绸之路经济带上的重要国家,分析两国农业支持水平和支持政策,有助于推动丝绸之路经济带建设与欧亚经济联盟有效对接。本文运用OECD(经济合作与发展组织)政策评价方法通过比较分析俄哈两国农业支持水平和支持政策,发现两国农业支持政策措施相同点多、差异性少。相同点是两国农业总体支持水平均呈上升趋势,对生产者的支持均以直接补贴为主,优惠信贷支持、补贴、税收优惠和价格支持是两国主要政策支持措施。差异性主要体现在支持水平的变化趋势以及支持政策的具体实施上。     

浅谈观赏植物的施肥技术

本文通过对观赏植物基本原则的阐述,提出了观赏植物在不同气候条件、不同品种、不同生长时期如何把握好观赏植物施肥的基本要点;最后提出了观赏植物施肥的基本方法。     

具时空时滞的扩散Musca domestica苍蝇模型的波前解

提出并研究了非线性项含有时滞且以卷积形式出现的扩散 Musca domestica 苍蝇模型,重点考察了该模型连结两一致稳态解的波前解的存在性。利用几何奇异摄动理论,证明了对一类特定形式的卷积核,只要时滞充分小,该模型的波前解仍然能得以保持。     

2株鸭源 H11N9亚型禽流感病毒的基因遗传进化及致病性分析

为了解从湖南省洞庭湖区鸭群中分离的2株 H11N9亚型禽流感病毒变异特点、进化规律及生物学特性,本研究对2株H11N9亚型禽流感病毒的HA、NA序列进行同源性和遗传进化分析,并用2株毒株对SPF鸡进行致病性试验。结果显示,本试验分离到2株 H11N9亚型禽流感毒株的 HA裂解位点均没有多个连续的碱性氨基酸插入,属于低致病性毒株;HA基因的受体结合位点均非常保守,具有典型的禽源性特征;NA基因序列与在周边国家野鸟中分离的H11N9亚型毒株的氨基酸同源性较高;鼻腔接种SPF鸡后,均能使鸡感染并通过喉头或泄殖腔排毒,但感染的鸡均不表现明显的临床症状,并且不能使同居鸡感染排毒。     

一株野鸟源H9N2亚型禽流感病毒的全基因组序列分析及致病性研究

为进一步了解2014年分离自我国南方野鸟粪便中的一株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)Wide Bird/Hu N/SC1400/2014(H9N2)(WB/400/14)的生物学特性,本研究对其进行全基因组序列测定、进化分析及SPF鸡、SPF鸭和BALB/c小鼠的感染性试验。序列分析显示:该分离株的HA裂解位点基序为333PAASDR↓GL340,其中不存在多个连续的碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒(LPAIV)氨基酸序列特征。该分离株不同基因片段来源较复杂,分别与H9、H6、H4、H1、H11、H10、H3等多种亚型的LPAIV同源性较高,呈现明显的多样性。感染性试验显示,WB/400/14不能够在SPF鸡和小鼠体内有效复制,但病毒感染SPF鸭后能够在部分脏器中检测到病毒的存在,并且感染鸭能通够过咽喉和泄殖腔同时向外排毒,而同居感染鸭仅通过泄殖腔向外排毒,表明分离株在SPF鸭群中具有良好的水平传播能力。本研究为AIV的监测和防控提供实验依据。     

动物运输应激源与应激反应影响因子研究进展

动物的运输是畜牧业的重要生产环节,但运输活动带来的动物福利问题也越来越受到关注。开展动物运输应激源和应激反应影响因子的研究,对深入认识动物运输应激本质和提出解决方案乃至相关立法具有重要意义。论文对前人开展的动物运输应激源(拥挤、禁食禁水、气温、装卸、颠簸等)的分离研究和应激反应影响因子(运输距离和运输时间、年龄和经验、性情、恐惧信息素)的研究进行了回顾整理,并分析了争议的原因,为动物运输应激领域研究提供参考或指出新的研究方向。     

1例犬胸椎骨折的诊断与治疗

<正>骨折是由于外力或病理作用使骨的完整性和连续性受到破坏,同时常伴有周围软组织不同程度的损伤。根据骨折部位是否与外界相通可分为闭合性骨折和开放性骨折;根据骨折发生的位置可分为骨干、骨骺和关节骨折。笔者就一例疑似胸椎骨折病例通过血常规检查和拍X光片检查,最后确诊为胸椎骨折,现将诊断过程报道如下。